發(fā)酵飼料是以有益微生物為發(fā)酵菌種,將飼料原料轉(zhuǎn)化為微生物菌體蛋白、生物活性小肽類氨基酸、微生物活性益生菌為一體的生物發(fā)酵飼料。其優(yōu)點(diǎn)在于通過微生物的發(fā)酵作用,降低抗?fàn)I養(yǎng)因子,提高飼料的營養(yǎng)價(jià)值,使飼料原料的理化性狀得到改善,從而提高動(dòng)物的消化利用率和適口性。微生物發(fā)酵飼料中的益生菌一般處于高活性水平,進(jìn)入腸道后不存在復(fù)蘇萌發(fā)過程,又含有豐富的益生代謝產(chǎn)物,使腸道調(diào)節(jié)和免疫保健功能體現(xiàn)得更充分,并且不需要大比例添加,對于緩解目前飼料原料價(jià)格高漲、人畜爭糧局面具有重要意義。
1國內(nèi)外發(fā)酵飼料的現(xiàn)狀
微生物發(fā)酵飼料是在人為控制條件下,應(yīng)用酵母、霉菌或細(xì)菌對一種或多種常規(guī)或非常規(guī)飼料原料進(jìn)行好氧或厭氧發(fā)酵,消除抗?fàn)I養(yǎng)因子,提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用效率,同時(shí)富集大量活性益生菌和功能性初級/次級代謝產(chǎn)物,而獲得的一種新型生物飼料。
目前,歐美國家和地區(qū)生物飼料的使用技術(shù)已經(jīng)較為成熟,德國和法國使用液體生物飼料的比例達(dá)到15%以上,荷蘭、芬蘭、丹麥等國規(guī)?;i場的生物飼料飼喂比例已經(jīng)達(dá)到60%~80%。中國目前液體生物飼料的生產(chǎn)和飼喂技術(shù)尚不成熟,但是固體發(fā)酵飼料從早期的有益微生物群(EM)發(fā)酵飼料、飼用酵母、發(fā)酵粕類(豆粕、棉粕、菜粕等)等,到近年出現(xiàn)的發(fā)酵全價(jià)料、發(fā)酵濃縮料、飼料伴侶等產(chǎn)品形式,獲得了飼料企業(yè)和養(yǎng)殖者的高度關(guān)注。
2技術(shù)調(diào)研情況
2.1 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)(農(nóng)業(yè)部飼料工業(yè)中心)技術(shù)調(diào)研
2.1.1 發(fā)酵飼料生產(chǎn)工藝
為了解決原料消毒和成品干燥等困難,課題組成功開發(fā)了呼吸膜技術(shù)。該技術(shù)的核心在于開發(fā)出帶有一個(gè)平衡膜的包裝袋,平衡膜可以調(diào)節(jié)氣壓。原料接種后就可以直接裝入包裝袋中,封口后在常溫條件下,進(jìn)行儲(chǔ)存發(fā)酵。
微生物在發(fā)酵過程中,會(huì)產(chǎn)生二氧化碳等氣體,使得包裝袋內(nèi)的氣壓大于外界常壓,氣壓平衡膜可以解決發(fā)酵這個(gè)氣體控制問題,當(dāng)袋內(nèi)氣壓達(dá)到某一臨界值時(shí),氣體會(huì)通過這個(gè)平衡膜排到外界。另外,外界的氣體始終沒有機(jī)會(huì)進(jìn)入包裝袋,即杜絕了外界雜菌的進(jìn)入,從而解決了染菌這一技術(shù)難題。該工藝既省略了消毒及干燥這兩個(gè)高耗能環(huán)節(jié),又減少了發(fā)酵過程中的翻拌及散熱等煩瑣操作。這種新型工藝,發(fā)酵過程不受環(huán)境溫度影響,也不需要調(diào)節(jié)溫度,發(fā)酵成熟所需時(shí)間與物料組成和環(huán)境溫度相關(guān),如果包裝袋不破損,保質(zhì)期可達(dá)3年。
2.1.2 發(fā)酵飼料菌種篩選
課題組研制出特定的微生物菌種組合,包括釀酒酵母、乳酸菌(以腸球菌為主)以及枯草芽孢桿菌MAl39等。MAl39能產(chǎn)生一種以脂肽類物質(zhì)為主要成分的細(xì)菌素,該細(xì)菌素對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌以及沙門氏菌具有強(qiáng)烈的殺滅作用,但是對乳酸菌、酵母菌、以及腸球菌的生長代謝沒有影響。該組合可以使乳酸菌迅速繁殖,占據(jù)數(shù)量優(yōu)勢,且綜合了好氧菌和厭氧菌發(fā)酵的優(yōu)點(diǎn),原料不需要消毒,可以直接用于接種培養(yǎng)。
2.1.3 技術(shù)成果
“高活菌無抗生素飼養(yǎng)用飼料呼吸膜固態(tài)發(fā)酵技術(shù)”大幅度降低了微生物發(fā)酵飼料的生產(chǎn)成本。與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相比,該技術(shù)成品不需要干燥,保質(zhì)期長,適合在中國廣大農(nóng)村推廣使用??梢砸粤畠r(jià)的豆渣、玉米漿和果渣等高水分含量的農(nóng)業(yè)或輕工副產(chǎn)物為原料,最大可以達(dá)到30%的使用比例。采用大比例添加高活菌含量的微生物發(fā)酵飼料,在未增加生豬飼養(yǎng)成本的條件下,實(shí)現(xiàn)了生豬(20 kg~出欄)無抗生素飼養(yǎng),其豬肉品質(zhì)經(jīng)檢驗(yàn)符合歐盟有關(guān)安全肉的相關(guān)要求。
2.2 大北農(nóng)集團(tuán)飼用微生物工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)調(diào)研
飼用微生物工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室成立于2010年12月,是由中華人民共和國科學(xué)技術(shù)部批準(zhǔn),依托于北京大北農(nóng)科技集團(tuán)股份有限公司籌建的企業(yè)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,2013年9月通過科技部驗(yàn)收。實(shí)驗(yàn)室主要研究方向涵蓋飼用微生物菌種資源創(chuàng)新、微生物發(fā)酵工藝與制劑工程、飼用微生物產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)規(guī)范、飼用微生物產(chǎn)品應(yīng)用基礎(chǔ)研究、微生物發(fā)酵新產(chǎn)品創(chuàng)制等多個(gè)領(lǐng)域。實(shí)驗(yàn)室搭建了微生物培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、免疫學(xué)及各類分析檢測、發(fā)酵小試、中試及后處理工藝與制劑等多個(gè)現(xiàn)代化專業(yè)化實(shí)驗(yàn)檢測平臺(tái)。
乳酸菌(益生菌制劑)包埋技術(shù):乳酸菌在應(yīng)用過程中遇到的最大困難是不容易保存,一般情況下,烘干后就會(huì)導(dǎo)致沒有活菌。乳酸菌包埋技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)1 g中含乳酸菌107個(gè),烘干后可以保留80%的活菌。包埋的關(guān)鍵技術(shù)在于包埋材質(zhì)是否可以在腸道中釋放,活菌的擴(kuò)繁方面也不存在問題。包埋的菌劑都是液態(tài)發(fā)酵的出料。包埋的乳酸菌保質(zhì)期可以達(dá)到6個(gè)月。
2.3 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所技術(shù)調(diào)研
該研究室主要開展抗菌肽及抗生素替代品創(chuàng)新,飼用抗菌肽/蛋白研發(fā);飼用益生菌研制;蛋白飼料原料的生物發(fā)酵處理等方面的研究。研究方向與成果:緊扣食物安全,應(yīng)用生物技術(shù)研制功能飼料、食品、藥品等新產(chǎn)品——抗菌蛋白、葡聚糖酶、菊粉酶基因工程菌,微生態(tài)制劑和新飼料蛋白產(chǎn)品。
3發(fā)酵飼料研究的關(guān)鍵技術(shù)
開發(fā)發(fā)酵飼料,主要涉及發(fā)酵基質(zhì)的選擇、發(fā)酵菌種的選擇以及發(fā)酵過程的控制3個(gè)方面的關(guān)鍵技術(shù)。
3.1 發(fā)酵基質(zhì)的選擇
發(fā)酵飼料在選擇發(fā)酵基料時(shí),既要考慮動(dòng)物日常所需營養(yǎng)物質(zhì)的種類及含量,如能量、氨基酸、維生素、微量元素等,又要考慮微生物生長所需的碳氮比、pH、水分、可發(fā)酵碳水化合物、滲透壓等,同時(shí)還要在劑型上兼顧后期混合使用相關(guān)的顆粒度、流散性等因素。常見可發(fā)酵基料分析見附表。
3.2 發(fā)酵菌種選擇
生產(chǎn)菌種是發(fā)酵過程的核心。發(fā)酵飼料的生產(chǎn)菌種很多,主要有乳酸菌、芽孢菌、酵母菌和霉菌等4類。中國農(nóng)業(yè)部2003年12月發(fā)布的第318號公告“飼料添加劑品種目錄”中包括:地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、兩歧雙歧桿菌、糞腸球菌、屎腸球菌、乳酸腸球菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、乳酸乳桿菌、植物乳桿菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母、沼澤紅假單胞菌等15種可直接飼喂動(dòng)物、允許使用的飼料級微生物飼料添加劑菌種。在目前應(yīng)用的主要菌種中,乳酸桿菌屬和糞鏈球菌屬為腸道正常存在的微生物,而芽孢桿菌屬和酵母菌僅零星存在于腸道中。所有菌屬中芽孢桿菌是最理想的微生物添加劑,具有較高的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性,對植物性碳水化合物具有較強(qiáng)的降解能力。
鑒于生產(chǎn)成本和菌種穩(wěn)定性所限,傳統(tǒng)飼料加工中能夠廣泛使用的只有枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、糞腸球菌、屎腸球菌、釀酒酵母等少數(shù)幾種。益生功能更顯著的乳酸桿菌和雙歧桿菌,因其抗逆性和穩(wěn)定性較差,并不能在生產(chǎn)實(shí)踐中廣泛應(yīng)用。
然而,發(fā)酵飼料中的游離水和可溶性營養(yǎng)成分可使乳酸菌濃度提高2~3個(gè)數(shù)量級,并維持?jǐn)?shù)月甚至1年以上。在發(fā)酵飼料中既可以選擇芽孢桿菌和酵母菌,亦可使用抗逆性較差但益生功能更為顯著的乳酸菌類發(fā)酵菌株。
不同菌種因各自性質(zhì)不同,作用效果不一。如乳酸桿菌耐高溫、耐高壓的性能差,在粉料中使用效果較好,而在顆粒料中使用效果較差。芽孢桿菌能耐受較高溫度、高壓及酸性環(huán)境,在顆粒料中多應(yīng)用以芽孢桿菌為主制成的微生態(tài)制劑,或選用經(jīng)過特殊材料包被的其他菌劑。因此,發(fā)酵飼料完全解除了高活性乳酸桿菌和雙歧桿菌的使用限制,在腸道健康調(diào)節(jié)、畜舍環(huán)境改善方面的效果也體現(xiàn)得更為顯著,這也是發(fā)酵飼料獲得認(rèn)可并快速推廣的主要原因。
3.3 發(fā)酵過程控制
發(fā)酵飼料通常是好氧或厭氧固態(tài)淺層發(fā)酵工藝,影響發(fā)酵過程的主要因素有碳氮比、含水量、溫度、物料粒度等,其微生物的生長規(guī)律、代謝調(diào)節(jié)和控制非常重要。
3.3.1 碳氮比
最適碳氮比因微生物種類差異,在10~100的范圍內(nèi)變化,其中可發(fā)酵的碳源和氮源的質(zhì)量比更為重要,更多情況下,氮源的種類決定了發(fā)酵過程。
3.3.2 含水量
含水量是決定發(fā)酵成功與否的關(guān)鍵因素。含水量過低,會(huì)造成物料膨脹程度降低、水張力增高、空氣殘留過多,從而導(dǎo)致前期好氧階段過長,乳酸菌發(fā)酵階段延后,發(fā)酵結(jié)束時(shí)間不易控制。含水量過高,會(huì)造成氧氣擴(kuò)散受限制,酵母等好氧菌的代謝產(chǎn)物積累不夠,并且會(huì)導(dǎo)致物料黏性增加、流散性差,后期飼喂時(shí)不易混勻。
3.3.3 溫度
發(fā)酵過程會(huì)產(chǎn)生大量的熱,固體發(fā)酵的溫度控制比液體發(fā)酵要困難得多,實(shí)際生產(chǎn)中一般通過降低發(fā)酵單元的體積和料層厚度控制料溫。
3.3.4 物料粒度
固定相基質(zhì)的有限擴(kuò)散,導(dǎo)致發(fā)酵過程中物料交換不充分,因此物料的粒度決定了發(fā)酵程度的高低。微生物是附著在物料顆粒表面重疊地生長繁殖,直接和物料接觸的細(xì)胞,與在此細(xì)胞上再生長的細(xì)胞會(huì)有所不同。從攝取營養(yǎng)的角度看,在外層生長的細(xì)胞是通過貼近細(xì)胞之間的孔隙來獲得營養(yǎng)的,這也有利于某些微生物的自組織行為,分泌特殊的功能性次級代謝產(chǎn)物。
4發(fā)酵飼料的研究開發(fā)思路
開發(fā)發(fā)酵飼料,應(yīng)先確定原料中有哪些動(dòng)物和有益菌可利用營養(yǎng)成分(粗蛋白質(zhì)、粗纖維、粗脂肪等)。根據(jù)主要可以利用的成分,再考慮需要外加哪些基質(zhì),進(jìn)一步分析和研究,最后確定產(chǎn)品定位。需要討論和確定適宜的菌種,如何獲得或篩選發(fā)酵菌種(菌種來源必須清楚和安全),發(fā)酵的菌種如何組合。在研發(fā)過程中還需要考慮如何降低微生物發(fā)酵飼料的生產(chǎn)成本,如何符合國家的相關(guān)要求和標(biāo)準(zhǔn)。在選擇液態(tài)發(fā)酵還是固態(tài)發(fā)酵工藝時(shí)還需要考慮工程放大、設(shè)備和運(yùn)行成本等問題。
5展 望
微生物發(fā)酵飼料是未來飼料產(chǎn)品的發(fā)展趨勢。技術(shù)調(diào)研更加明確了發(fā)酵飼料是實(shí)施無抗生素動(dòng)物養(yǎng)殖的重要部分。大劑量使用高活菌含量的微生物發(fā)酵飼料可以明顯地改善動(dòng)物的生產(chǎn)性能,提高動(dòng)物的健康水平。“回歸自然,倡導(dǎo)綠色”,是未來畜牧業(yè)發(fā)展的必然趨勢,微生物發(fā)酵飼料新技術(shù)已經(jīng)成為支撐中國特色生態(tài)循環(huán)養(yǎng)殖的關(guān)鍵技術(shù)。發(fā)酵飼料作為國家“十三五”期間戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)重點(diǎn)產(chǎn)品,將成為飼料產(chǎn)業(yè)供給側(cè)改革的重要突破口。